L-3000四(si)元(yuan)低壓(ya)自(zi)動進(jin)樣(yang)高效液相色譜(pu)用於研(yan)究蛋(dan)白質(zhi)的(de)結構動力學和構型變化(hua)，可(ke)更(geng)好地確(que)定(ding)它(ta)們的(de)高(gao)級(ji)結構。氘(dao)是氫的(de)壹種(zhong)重同位素(su)，因此可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)質譜(pu)對氘(dao)含量(liang)進(jin)行(xing)測量(liang)或“稱重”。

科學家們使用HDX-MS研(yan)究獲(huo)得(de)的(de)信(xin)息(xi)對不同“狀(zhuang)態”的(de)蛋(dan)白(bai)質高級(ji)結構進(jin)行(xing)對比，如對比與候選藥(yao)物(wu)結合前和與結合後(hou)的(de)構(gou)型變化(hua)，定(ding)位藥(yao)物(wu)結合部位和結合的(de)強(qiang)弱(ruo)。通過(guo)計算(suan)和比較氘交(jiao)換水平(ping)的(de)差別(bie)來獲(huo)得(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)構型變化(hua)的(de)信(xin)息(xi)。HDX-MS能夠在(zai)溶(rong)液中監測蛋(dan)白(bai)結合域(yu)相互作(zuo)用情(qing)況(kuang)、蛋白(bai)質結合動力學、配體結合以(yi)及(ji)蛋(dan)白(bai)質(zhi)折疊等相關研(yan)究。

HDX-MS研(yan)究需(xu)要(yao)對蛋(dan)白質(zhi)構型的(de)微(wei)小(xiao)變化(hua)進(jin)行(xing)檢(jian)測，高(gao)效(xiao)率的(de)色譜(pu)分離(li)對達到高品(pin)質(zhi)的(de)數據(ju)結果至(zhi)關重要(yao)。ACQUITY  UPLC M-Class系統(tong)更(geng)高的(de)耐壓(ya)確(que)保(bao)了(le)能夠在(zai)0℃對酶(mei)切肽段快(kuai)速(su)進(jin)行(xing)LC分離(li)和質譜(pu)檢(jian)測。全(quan)自(zi)動HDX-MS系統(tong)整合了(le)HDX-MS的(de)所(suo)有步驟，包(bao)括全自(zi)動的(de)氫氘(dao)交換樣品(pin)制(zhi)備(bei)過(guo)程、蛋(dan)白(bai)質(zhi)序列(lie)確定、氘(dao)交換曲(qu)線(xian)以(yi)及(ji)沃(wo)特(te)世(shi)*的(de)DyanmX HDX數據(ju)分析(xi)軟(ruan)件。

同時(shi)發布(bu)的(de)還(hai)有沃特世專門開(kai)發的(de)用於用於蛋白(bai)質“在(zai)線(xian)酶切”的(de)UPLC色譜(pu)柱(zhu)，即(ji)Waters Enzymate BEH在(zai)線(xian)Pepsin酶切柱(zhu)，將HDX-MS效(xiao)果(guo)提(ti)升(sheng)到壹個(ge)新(xin)高度(du)。ACQUITY UPLC M-Class系統(tong)與Waters SYNAPT G2-Si或(huo)Xevo G2-S QTof質(zhi)譜(pu)儀(yi)聯(lian)用，提(ti)供(gong)高(gao)質(zhi)量(liang)的(de)圖(tu)譜(pu)和數據(ju)，得(de)到HDX-MS分析(xi)所需(xu)要(yao)的(de)微(wei)小(xiao)質量(liang)變化(hua)。將(jiang)所有這些創(chuang)新(xin)技(ji)術(shu)組合在(zai)壹起，沃(wo)特世提(ti)供(gong)了(le)完整的(de)且(qie)*的(de)HDX-MS分析(xi)平臺。

L-3000四元(yuan)低壓(ya)自(zi)動進(jin)樣(yang)高效液相色譜(pu)

對於復雜(za)樣品(pin)，特(te)別(bie)是當(dang)樣品(pin)中的(de)目(mu)標(biao)組分如(ru)蛋(dan)白質(zhi)、肽或小(xiao)分子的(de)動態範圍(wei)很(hen)寬時(shi)，二(er)維(wei)LC是非常(chang)有用的(de)策略。利(li)用此(ci)技(ji)術(shu)能夠增加(jia)色譜(pu)峰(feng)容量(liang)，具(ju)體的(de)操作(zuo)是先通(tong)過(guo)*維(wei)分離(li)對蛋(dan)白或(huo)肽進(jin)行(xing)分組(zu)，所(suo)得(de)到的(de)每壹個(ge)餾(liu)分經過(guo)富集，再通(tong)過(guo)具(ju)有不同選(xuan)擇(ze)性的(de)第(di)二(er)維(wei)色譜(pu)柱(zhu)進(jin)行(xing)分離(li)。

ACQUITY UPLC M-Class系統(tong)采用直觀(guan)易(yi)用的(de)向(xiang)導(dao)菜(cai)單(dan)進(jin)行(xing)方法(fa)設置、標(biao)準化(hua)的(de)色譜(pu)柱(zhu)以(yi)及(ji)具(ju)有高重現(xian)性(xing)的(de)色譜(pu)儀(yi)器有效簡化(hua)了(le)2D-LC分離(li)。智能化(hua)閥(fa)操作(zuo)增(zeng)加(jia)了(le)樣品(pin)通(tong)量(liang)，同時(shi)zui大程度(du)地提(ti)高(gao)數據(ju)質量(liang)。