高效液相(xiang)色譜(pu)的(de)測(ce)量方(fang)式(shi)妳(ni)沒聽(ting)過(guo)

　　色(se)譜(pu)柱(zhu)的填(tian)料(liao)和流動相(xiang)的組分(fen)應(ying)按(an)各品(pin)種項下(xia)的(de)規(gui)定(ding).常(chang)用(yong)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)填(tian)料(liao)有(you)矽膠(jiao)和化學鍵合矽(gui)膠(jiao)。後(hou)者以(yi)十(shi)八烷基(ji)矽烷鍵合矽(gui)膠(jiao)很(hen)常(chang)用(yong)辛(xin)基(ji)鍵合矽(gui)膠(jiao)次之，氰(qing)基(ji)或氨基(ji)鍵合矽(gui)膠(jiao)也(ye)有使用(yong)；離(li)子交換(huan)填(tian)料(liao)用(yong)於離(li)子交換(huan)色譜(pu)；凝(ning)膠(jiao)或(huo)玻璃(li)微球等，用(yong)於分(fen)子(zi)排(pai)阻(zu)色(se)譜(pu)等(deng)。註樣(yang)量(liang)壹(yi)般為(wei)數微升。除另(ling)有(you)規(gui)定(ding)外(wai)，柱(zhu)溫為(wei)室(shi)溫，檢(jian)測(ce)器為(wei)紫(zi)外(wai)吸(xi)收(shou)檢(jian)測(ce)器。

　　1.在(zai)用(yong)紫(zi)外(wai)吸(xi)收(shou)檢(jian)測(ce)器時(shi)，所(suo)用流(liu)動相(xiang)應符(fu)合紫(zi)外(wai)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法項下(xia)對(dui)溶(rong)劑(ji)的要(yao)求(qiu)。

　　正(zheng)文(wen)中(zhong)各品(pin)種項下(xia)規(gui)定(ding)的(de)條件(jian)除固定(ding)相(xiang)種類(lei)、流動相(xiang)組分(fen)、檢(jian)測(ce)器類(lei)型不(bu)得(de)任(ren)意改(gai)變外，其(qi)余如(ru)色譜(pu)柱(zhu)內(nei)徑、長度(du)、固定(ding)相(xiang)牌號、載(zai)體粒度(du)、流動相(xiang)流速(su)、混合流(liu)動相(xiang)各組分(fen)的(de)比例(li)、柱(zhu)溫、進(jin)樣(yang)量(liang)、檢測(ce)器的(de)靈(ling)敏(min)度(du)等，均(jun)可適當(dang)改(gai)變以(yi)適(shi)應具(ju)體品(pin)種(zhong)並達(da)到(dao)系(xi)統適(shi)用(yong)性(xing)試(shi)驗(yan)的(de)要(yao)求(qiu)。壹(yi)般色(se)譜(pu)圖(tu)約(yue)於(yu)20分(fen)鐘(zhong)內(nei)記(ji)錄(lu)完(wan)畢(bi)。

　　2.系(xi)統適(shi)用(yong)性(xing)試(shi)驗(yan)

　　按(an)各品(pin)種項下(xia)要(yao)求(qiu)對(dui)儀(yi)器進(jin)行適用(yong)性(xing)試(shi)驗(yan)，即(ji)用(yong)規(gui)定(ding)的(de)對(dui)照(zhao)品(pin)對儀器進(jin)行試(shi)驗(yan)和調(tiao)整(zheng)，應達(da)到(dao)規(gui)定的要(yao)求(qiu)；或(huo)規(gui)定分(fen)析(xi)狀(zhuang)態下(xia)色(se)譜(pu)柱(zhu)的小理論(lun)板(ban)數、分(fen)離(li)度(du)和拖(tuo)尾(wei)因子.

　　色譜(pu)柱(zhu)的理(li)論(lun)板(ban)數　在選(xuan)定的(de)條件(jian)下(xia)，註入(ru)供(gong)試(shi)品(pin)溶(rong)液或(huo)各品(pin)種項下(xia)規(gui)定(ding)的(de)內(nei)標(biao)物質(zhi)溶(rong)液，記(ji)錄(lu)色(se)譜(pu)圖(tu)，量(liang)出(chu)供(gong)試(shi)品(pin)主(zhu)成(cheng)分(fen)或(huo)內(nei)標(biao)物質(zhi)峰(feng)的(de)保留(liu)時間t(R)和半高峰(feng)寬(kuan)W(h/2)，按n=5.54[t(R)╱W(h/2)]^2計算(suan)色(se)譜(pu)柱(zhu)的理(li)論(lun)板(ban)數，如(ru)果測(ce)得理(li)論(lun)板(ban)數低於各品(pin)種項下(xia)規(gui)定(ding)的(de)小理論(lun)板(ban)數，應改變色譜(pu)柱(zhu)的某些(xie)條件(jian)(如(ru)柱(zhu)長、載(zai)體性(xing)能(neng)、色譜(pu)柱(zhu)充填(tian)的(de)優(you)劣(lie)等)，使(shi)理論(lun)板(ban)數達(da)到(dao)要(yao)求(qiu)。

　　分(fen)離(li)度(du)　定量分(fen)析(xi)時，為便於準確(que)測(ce)量，要(yao)求(qiu)定(ding)量(liang)峰(feng)與其他峰(feng)或(huo)內(nei)標(biao)峰(feng)之間(jian)有較好(hao)的(de)分(fen)離(li)度(du)。分(fen)離(li)度(du)(R)的計算(suan)公(gong)式(shi)為(wei)：R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)， 式(shi)中(zhong) t(R2)為相(xiang)鄰兩(liang)峰(feng)中(zhong)後(hou)壹(yi)峰(feng)的(de)保留(liu)時間； t(R1)為相(xiang)鄰兩(liang)峰(feng)中(zhong)前(qian)壹(yi)峰(feng)的(de)保留(liu)時間； W1及(ji)W2為此相(xiang)鄰兩(liang)峰(feng)的(de)峰(feng)寬(kuan)。除另(ling)外(wai)有(you)規(gui)定(ding)外，分(fen)離(li)度(du)應大(da)於1.5。

　　拖(tuo)尾(wei)因子

　　為保證(zheng)測(ce)量精(jing)度(du)，特別當采(cai)用峰(feng)高法測(ce)量時(shi)，應(ying)檢(jian)查待測(ce)峰(feng)的(de)拖(tuo)尾(wei)因子(T)是否(fou)符合各品(pin)種項下(xia)的(de)規(gui)定(ding)或不同濃度(du)進(jin)樣(yang)的(de)校正(zheng)因子誤差(cha)是(shi)否符合要(yao)求(qiu)。拖(tuo)尾(wei)因子計算(suan)公(gong)式(shi)為(wei)：

　　W(0.05h) T=-2d1 式(shi)中(zhong) W(0.05h)為0.05峰(feng)高處(chu)的峰(feng)寬(kuan)；

　　d1為峰(feng)至(zhi)大(da)至(zhi)峰(feng)前(qian)沿(yan)之間(jian)的距離(li)。除另(ling)有(you)規(gui)定(ding)外(wai),T應在0.95～1.05間(jian)。

　　也(ye)可按各品(pin)種校正因子測(ce)定項下(xia)，配制相(xiang)當於(yu)80%、100%和120%的對(dui)照品(pin)溶(rong)液，加(jia)入(ru)規(gui)定量的內(nei)標(biao)溶(rong)液，配成(cheng)三種(zhong)不同(tong)濃度(du)的溶液，分(fen)別註樣(yang)3次，計算(suan)平(ping)均(jun)校(xiao)正因子，其相(xiang)對標(biao)準偏差(cha)應(ying)不大(da)於2.0%。